Поговорим об анализах на герпес: какие они бывают и как расшифровать их результаты

Диагностика герпетической инфекции в большинстве случаев происходит при обычном внешнем осмотре пациента. Однако в некоторых случаях необходимо проводить специальный анализ на герпес, вид и специфика которого зависят в основном от типа инфекции и формы ее протекания.

Виды диагностики герпеса

Общая диагностика герпеса включает в себя следующие составляющие:

• Выяснение жалоб пациента;
• Сбор анамнеза, в том числе эпидемиологического, для выявления возможных контактов больных герпесом;
• Осмотр пациента.

Для определения состояния пациента и наличия у него тех или иных заболеваний используют стандартные методы обследований, такие как ФГ грудной клетки, ЭКГ, ФГДС, УЗИ, общие анализы крови и мочи, биохимический анализ крови и другие исследования.

Для диагностики и дифференциальной диагностики герпетической инфекции используют дополнительные лабораторные исследования:

• Культуральный метод;
• Полимеразная цепная реакция (ПЦР);
• Иммуноферментный анализ (ИФА).

Также в некоторых лабораториях применяется цитологический метод, при котором соскоб с пораженного участка кожи окрашивают по Романовскому-Гимзе и обнаруживают клетки с несколькими ядрами и включениями.

Простой осмотр как самый быстрый способ диагностики герпетической инфекции

Для герпесных высыпаний характерна определенная специфичность. На коже и слизистых можно увидеть пузырьковые высыпания разной степени давности: везикулы, пустулы, эрозии, язвочки, корочки. Высыпаниям могут сопутствовать лихорадка, сухость слизистых рта (при герпетическом стоматите), увеличение лимфатических узлов, неприятный запах изо рта. Поэтому простой осмотр для опытного врача может являться основным методом диагностики.

При необходимости проводят дополнительные лабораторные методы исследования, которые подтверждают либо отвергают первоначальный предположительный диагноз.

Культуральный метод анализа: старый, долгий и надёжный

Культуральный метод – дорогостоящий, длительный, но, пожалуй, самый надежный вариант анализа. Как процесс, он представляет собой посев биоматериала на питательные среды, а затем исследование выросших микроорганизмов. Среду и условия подбирают под предполагаемого возбудителя. Особенностью культурального метода при выявлении вирусов, в том числе и вируса герпеса, является то, что вирусы развиваются только в живых клетках.

Для культивирования вируса герпеса идеально подходят куриные эмбрионы (вирус вызывает характерные изменения у эмбриона).

Операционно процесс выгладит так: из пузырьков на коже больного забирают содержимое и заражают им куриный эмбрион. Заражение осуществляют разными способами:

• На хорион-аллантоисную мембрану;
• В амниотическую полость;
• В аллантоисную полость;
• В желточный мешок.

Для изучения результатов берут соответствующий участок яйца и помещают в стерильную воду. Характер поражений анализируют, рассматривая культуру на темном фоне.

Полимеразная цепная реакция: анализ на ДНК герпесвируса

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – метод молекулярной биологии, с помощью которого можно значительно увеличить концентрацию определенных фрагментов ДНК в биопробе.

Применяется ПЦР для выявления герпесвируса в крови, моче, мокроте, слюне, околоплодных водах в момент рецидива. Нужный ген многократно клонируют с помощью соответствующих праймеров (коротких одноцепочечных молекул ДНК) и фермента ДНК-полимеразы. Копирование происходит только при наличии необходимого гена в исследуемом образце.

В дальнейшем ПЦР-фрагмент подвергают секвенированию – определяют его аминокислотную или нуклеотидную последовательность, выявляют возможные мутации. Индуцированный мутагенез используется для изменения патогенных свойств вируса, а также для лишения его возможности размножения.

Значимость метода ПЦР как анализа на герпес заключается в том, что с его помощью можно обнаруживать вирусные инфекции сразу же после заражения, то есть за недели или даже месяцы до клинических проявлений болезни. Также с помощью ПЦР возможно четкое типирование вируса.

Иммуноферментный анализ как косвенный, но точный способ диагностики

ИФА (иммуноферментный анализ) – иммунологический метод определения макромолекул, вирусов и различных соединений. В основе метода лежит специфическая реакция антиген-антитело. С помощью определенного фермента можно выделить образовавшийся комплекс.

После проникновения герпесвируса в организм, последний реагирует образованием антител – защитных иммуноглобулинов классов G и M. Первоначально появляются IgM, затем IgG. Соответственно, если эти антитела в организме имеются, то и вирус герпеса присутствует. На выявление этих антител и направляется сам анализ.

Качественная реакция ИФА определяет наличие антител, тип вируса и вероятность предшествующих рецидивов. Количественная реакция ИФА определяет титр антител, а следовательно, и состояние противовирусного иммунитета. Высокие титры антител к герпесу могут свидетельствовать о недавнем рецидиве болезни.

Выделяют два основных способа проведения ИФА: прямой и непрямой.

При прямом анализе к исследуемой сыворотке добавляют антиген герпеса со специфической меткой. При наличии в сыворотке антител образуются комплексы антиген-антитело. После промывания тест-системы к комплексам добавляют специальные ферменты. Они имеют сродство к этим комплексам и вступают с ними в реакцию, окрашивая пробы. Определяя концентрацию окрашенного вещества в пробе, делают вывод о концентрации антител в крови.

При непрямом анализе на герпес процесс усложняется. Меченые антитела добавляют после предварительной реакции между антителами и антигеном без всяких меток. В результате образуется комплекс антитело + антиген + антитело. При этом антиген получается как бы зажатым между двумя антителами. Поэтому метод получил второе название «сэндвич-метод». Такой двойной контроль повышает чувствительность и специфичность реакции ИФА, что позволяет определить антитела при их низкой концентрации в пробе.

Специфичность лучших тест-систем приближается к 100%, что обуславливает высокую точность анализа с помощью метода ИФА.

Анализы на герпес за границей

За границей используют три основных вида анализа на герпес:

• Покит;
• Херпеселект;
• Вестерн Блот.

Покит представляет собой экспресс-анализ, выявляющий вирус herpes simplex 2 типа. Специфичность составляет 94-97%. На анализ берется кровь из пальца, результаты анализа получают в течение десяти минут. Для беременных этот способ не используется.

Херпеселект включает в себя два метода: ЭЛИЗА и иммуноблоттинга. С их помощью выявляют антитела к вирусу herpes simplex обоих типов. Эти анализы можно использовать при беременности. Результат получают в течение одной-двух недель после забора крови из вены. Второй вариант почти в два раза дороже первого.

Вестерн Блот считается «золотым стандартом» в научных исследованиях. Определяет оба типа вируса простого герпеса. Отличается высокой чувствительностью и специфичностью (более 99%). Также может использоваться при беременности. Результат готов через две недели после взятия анализа.

Все перечисленные методы эффективны через 3-4 месяца от момента заражения.

Анализы на герпетическую инфекцию у беременных

Перед планированием беременности необходимо обследоваться на генитальный герпес, потому что эта форма инфекции в определённых ситуациях может быть очень опасна для плода. Наиболее частые осложнения – детский церебральный паралич и умственная отсталость. При выявлении генитальной герпетической инфекции нужно пройти курс лечения и лишь потом планировать беременность.

Беременность и герпес

Особенно опасны рецидивы или первичная инфекция в первые 12 недель беременности, когда формируется плод. Если клиника стертая, но есть подозрения на заболевание, необходимо провести ИФА. Высокие титры IgM говорят о первичной инфекции или рецидиве.

На заметку: существует «менструальная» форма простого герпеса, при которой рецидивы возникают ежемесячно за 2-5 дней до кровотечения, что, вероятно, связано с усиленным синтезом прогестерона, подавляющего иммунитет. Этот факт нужно учитывать при проведении анализа на герпес в этот период.

Инфицирование герпесвирусом во время родов

Расшифровка анализов

Как правило, чаще всего для лабораторного выявления герпетической инфекции в России используют иммуноферментный анализ. Чтобы понять результаты этого анализа, необходимо знать следующие значения формулировок:

• Anti-HSV IgG (антитела к вирусу герпеса класса иммуноглобулинов G) говорят о перенесенном заболевании, могут определяться в течение всей жизни;
• Anti-HSV IgM (антитела к вирусу герпеса класса иммуноглобулинов M) свидетельствуют об остром процессе, сохраняются до двух месяцев.

Тогда становится понятным, о чем свидетельствуют следующие результаты:

• Anti-HSV IgG –, Anti-HSV IgM –. Инфицирования нет. Беременные женщины должны обследоваться каждый триместр беременности, так как отсутствует защита;
• Anti-HSV IgG +, Anti-HSV IgM +. Рецидив заболевания. У беременных женщин возможна передача вируса плоду трансплацентарным путём, вероятно заражение ребенка при родах;
• Anti-HSV IgG –, Anti-HSV IgM +. Первичная инфекция. Есть угроза плоду у беременных женщин.
• Anti-HSV IgG +, Anti-HSV IgM –. Есть иммунитет к герпесу.

Важным показателем является индекс авидности – оценка способности IgG связываться с герпесвирусом для его нейтрализации.

• Отрицательный индекс авидности говорит об отсутствии инфекции. И, следовательно, об отсутствии защиты плода;
• Авидность менее 50% – обнаружены низкоавидные антитела. Говорят о первичной инфекции;
• 50-60% – означает, что результаты интерпретировать сложно, и через 2 недели анализ нужно повторить;
• Более 60% – найдены высокоавидные антитела. Свидетельствуют о носительстве или хронической инфекции. Первичная инфекция не угрожает.

В отношении ПЦР все проще. Положительная реакция – вирус есть. Отрицательная – вируса нет.

Чтобы обследоваться на герпес, достаточно сдать на исследование кровь, мочу, взять соскоб со слизистых или содержимое имеющихся на коже пузырьков. Какой-то особой подготовки для сдачи анализов не требуется, и нужно следовать обычным рекомендациям: желательно кровь сдавать натощак и накануне воздержаться от приема жирной пищи.

Направление на анализ дает лечащий врач в поликлинике. После процедуры не забудьте вновь посетить врача, потому что только он должен дать интерпретацию результатов - во избежание неправильной трактовки и для определения дальнейшей тактики лечения.